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做好這幾點(diǎn),輕松解決酶聯(lián)免疫試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題

更新時(shí)間:2022-07-12      點(diǎn)擊次數(shù):1529

Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)的必要性,通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)可以熟悉整個(gè)實(shí)驗(yàn)的流程,發(fā)現(xiàn)可能忽略的問(wèn)題;可以測(cè)試樣本和試劑盒是否匹配,一旦出現(xiàn)不匹配的情況,不至于浪費(fèi)過(guò)多樣本;可以對(duì)樣品中目的分析物的濃度作一下大致參考,以確定合適稀釋度。

  一、Clover®酶聯(lián)免疫試劑盒使用注意事項(xiàng):

  1. 室溫低于20或試劑及樣品未回到室溫(20- 25)會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。

  2. 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥過(guò)久的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感,避免直接暴露在光線下。

  4. 混合要均勻,洗板要*(包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻)。

  5. 終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì),避免接觸皮膚。

  6. 不要使用過(guò)了有效期的試劑盒,也不要混合使用不同批次的試劑盒,這樣會(huì)引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。

  7. 試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8,切勿冷凍。

      二、剩余試劑的妥善保存:

    酶聯(lián)免疫試劑盒恢復(fù)至室溫后,取出要使用的酶標(biāo)板孔,未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時(shí)放回鋁箔袋,加入干燥劑,封緊封口,冷藏保存。

    試劑盒常用檢測(cè)方法簡(jiǎn)介

    ELISA試劑盒一般適合樣品檢測(cè)量大,實(shí)驗(yàn)室中常用于初篩的檢測(cè)方法。若檢測(cè)到陽(yáng)性樣本,再用確認(rèn)方法做準(zhǔn)確定量。

    試劑盒檢測(cè)方法及優(yōu)點(diǎn)介紹:

    A、間接法:此測(cè)定方法與直接法類(lèi)似,差別在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。

    優(yōu)勢(shì):二抗可以加強(qiáng)信號(hào),而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析,不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它最多的免疫反應(yīng)性。

    B、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。

    優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)短,因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng)。

    C、雙抗體夾心法:被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體,另一個(gè)則是檢測(cè)抗體,此抗體可用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原的量,或不標(biāo)記,再透過(guò)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量,這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合部位。

 

 

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